一、蓝狐人工授精及精液冷冻技术研究与应用（论文文献综述）
张柳明[1]（2021）在《牛磺酸对湖羊精液常温保存效果的研究》文中研究指明湖羊是世界着名的多胎绵羊品种,具有四季发情、一年两胎和生长发育快等优点。随着湖羊人工授精（AI）技术的大规模推广应用,养殖企业和养殖户对湖羊精液的需求量也越来越大。然而,目前湖羊精液存在常温保存时间短、精子活力低、受胎率不高等问题,严重影响了我国湖羊养殖规模的进一步扩大。因此,高效稳定的湖羊精液稀释液配方和保存温度十分关键,并且抗氧化剂的添加成为湖羊精液保存的有效研究导向。本试验选取牛磺酸（Tau）,探讨其在湖羊精液常温保存过程中的作用效果。首先从五种常温保存稀释液中筛选出最佳保存效果的配方,其次筛选出湖羊精液常温保存的最适温度,最后向此配方中分别添加10、20、40、80、100 mM的Tau,通过检测精子活力等运动参数、质膜完整率等功能完整性参数、丙二醛（MDA）含量等氧化应激参数、线粒体膜电位和受胎率等指标,分析其对湖羊精液常温保存效果的影响。本研究获得的主要结果如下:1.在5种常温保存稀释液中,稀释液A保存效果最佳,其主要成分是由15.35 g的Tris、8.20 g的柠檬酸、10.00 g的果糖、0.16 g的青霉素和0.35 g的链霉素硫酸盐溶于500.00 mL灭菌的超纯水构成。稀释液A在保存1～6 d内的精子活率、活力、顶体完整率、直线速率（VSL）、曲线速率（VCL）、路径速率（VAP）、侧摆幅度（ALH）和移动角度（MAD）最高且下降缓慢。稀释液A保存精子的有效存活时间达到3.08 d,显着高于其它四种稀释液（P≤0.05）。相比于其它稀释液,稀释液A在保存2～6d内的顶体完整率显着高于其它稀释液（P≤0.05）;相比于其它稀释液,稀释液A在保存1～4 d内的质膜完整率最高。因此,该配方对湖羊精液常温保存的效果较好,将稀释液A作为后续研究的基础稀释液。2.采用稀释液A,将稀释后的精液分别保存在15℃、20℃和25℃。保存2 d内,25℃下保存的精子活力最高;保存3～5 d内,20℃下保存的精子活力最高;保存6～9d内,15℃下保存的精子活力显着高于其它各组（P≤0.05）。15℃下保存的精子有效存活时间和总存活时间分别可达5.67 d、18.73 d,显着高于其它各组（P≤0.05）。保存1 d时,15℃下保存的精子质膜完整率显着高于其它各组（P≤0.05）;保存3～5 d内,15℃和20℃下保存的精子质膜完整率和顶体完整率显着高于25℃下保存的精子质膜完整率和顶体完整率（P≤0.05）;保存7 d时,15℃下保存的精子质膜完整率显着高于其它各组（P≤0.05）。保存5 d时,15℃下保存的精子活性氧（ROS）水平显着低于25℃组（P≤0.05）,超氧化物歧化酶（SOD）活力显着高于其它各组（P≤0.05）。因此,15℃为湖羊精液常温保存的最适温度,将15℃作为后续研究的精液保存温度。3.以稀释液A为基础稀释液,分别添加10、20、40、80和100 mM的Tau,结果表明,随着Tau浓度的提高,各处理组的精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率、总抗氧化能力（T-AOC）、SOD活力、过氧化氢酶（CAT）活力和线粒体膜电位呈现先升高后降低的趋势,精液中的MDA含量变化则呈相反趋势,精子中ROS含量呈逐渐下降的趋势。当Tau浓度为20 mM时,可显着提高精子质膜完整率、顶体完整率、SOD活力、CAT活力、T-AOC、线粒体膜电位和活率、活力、VSL等运动性能（P≤0.05）,还可以降低保存第5 d时精子的ROS的含量和精液中的MDA含量（P≤0.05）。采用常温保存2 d的20 mM Tau的精液进行AI,利用B超妊娠检测得到的受胎率为75.00%。因此,20 mM Tau为湖羊精液常温保存的最适添加浓度。
吴汝梓,郝芯缈,刘志平,韩欢胜[2]（2019）在《蓝狐精液冷冻前后精子运动状态及超微结构变化》文中进行了进一步梳理为了探究蓝狐精液冷冻前后精子的运动状态及超微结构变化,试验取8只优质雄性蓝狐的精液,使用精子动力分析系统（IVOS）检测精液冷冻前后精子运动状态,并利用透射电镜观察冷冻前后精子的超微结构变化。结果表明:精子冷冻复苏后,快速直线运动的精子只有25.7%,与鲜精对比差异性极显着（P<0.01）,中速运动的精子占39.8%,慢速运动的精子占4.2%,不运动的精子占30.9%,精子存活率下降25.9%。不同批次冷冻精液的精子存活率及快速直线运动的精子差异性显着（P<0.05）。精液冷冻后精子头部质膜结构损伤严重,顶体完整率仅占25.0%,精子赤道段、颈部、尾部、线粒体、微管结构变化不明显。
尚成志,李明,于新生,王冠菊,鲍亚萍,宝力朝鲁,李勇[3]（2019）在《蓝狐细管冻精标准化生产技术的研究》文中研究表明解决狐狸精子在冷冻及解冻过程中会出现的复苏率低、形态结构异常,特别是顶体畸形率高的问题,筛选出一种理想的狐狸精液冷冻稀释液的配方,建立起一整套科学成熟规范的冷冻精液制作流程,实现狐狸细管型冷冻精液的工厂化、标准化、商业化生产,是摆在业内研究人员面前的一道难题。本公司科研人员通过不懈努力,实现了芬兰蓝狐细管冻精的标准化批量生产。用自己生产的不同批次的芬兰蓝狐细管冻精对本地狐狸人工授精,总受胎率达到了76%～85%。现就研究成果和主要做法与业界同仁分享,以共同推动狐狸冷冻精液人工授精技术的发展。
吴汝梓[4]（2019）在《蓝狐精液冷冻及冷冻前后精子超微结构变化》文中研究说明引进芬兰优质种蓝狐,通过使用人工授精技术扩繁及改良,使我国蓝狐养殖业近20多年来得到了快速发展。目前,蓝狐使用鲜精输精受孕率超过80%。但由于缺乏相应的育种手段,种质呈现逐年退化趋势,不得不重复引进。精液冷冻技术理论上可以无限期的保存蓝狐精液,实现精液远距离的交流,同时对于生产蓝霜狐（银狐♂×蓝狐♀）具有巨大的应用意义。然而,目前蓝狐精液冷冻技术在世界范围内尚未成熟,因精子冻融后存活率低下,显着影响母狐的受孕率。为进一步了解超低温冷冻对蓝狐精子运动性及内部结构造成的损伤,从而选择更优质的冷冻保护剂和完整的蓝狐精液冷冻工艺系统,进行了本试验研究。试验（一）:试验共分4组,法国卡苏精液冷冻稀释液（Ⅰ）、东林Ⅱ号—卵黄冷冻稀释液（Ⅱ）、Tris—卵黄冷冻稀释液（Ⅲ）及对照组常温稀释液东林Ⅱ号（Ⅳ）。冻融后检测三种冷冻稀释液冷冻效果,分别使用伊红—苯胺黑染色法、低渗肿胀法、考马斯亮蓝染色法检测精子存活率、精子质膜完整率、精子顶体完整率,同时检测37℃精子的存活时间及生存指数并通过与鲜精对比综合选定最佳的冷冻稀释液;试验（二）:将原精分为A、B两组,A组常温稀释,B组选用Ⅲ稀释液分3批分别为B1、B2、B3组对蓝狐精液冷冻,通过IVOS精子运动检测系统检测4组精子运动情况,并通过透射电子显微镜观察A、B,两组精子内部结构;试验（三）:选取解冻后精子活率高于0.3的精液对15只母蓝狐进行输精试验。结果显示:超低温冷冻对蓝狐精子的损伤很大,与Ⅳ组相比,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组精子冻融后存活率平均下降48.3%,精子质膜完整率平均下降48%,顶体完整率平均下降37.4%;37℃时的冻融后精子平均存活时间（13h）及平均生存指数（2.25）远低于Ⅳ组的存活时间（37h）和生存指数（7.85）,精子在解冻后由于复苏温度高激发精子运动,但精子存活时间较短;在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组中,Ⅲ组精子存活率、质膜完整率、顶体完整率均高于Ⅰ、Ⅱ组;三种蓝狐精液冷冻稀释液对蓝狐精子保护的效果依次为:Ⅲ>Ⅰ>Ⅱ;A、B组精子运动性差异极显着（P<0.01）,B组快速运动的精子平均占25.1%,中速运动的精子平均占39.8%,慢速运动的精子占平均4.2%,不运动的精子平均占30.9%;B1、B2、B3组精子存活率及快速运动的精子差异显着（P<0.05）。冷冻工艺存在人工操作因素影响,建议使用自动冷冻机冷冻;使用透射电子显微镜观察,B:组损伤最严重的是精子头部膜结构,顶体完整率仅占25%,冷冻对精子赤道段、颈部、尾部、线粒体及微管损伤较小;虽然蓝狐精液冻融后精子活力达0.3以上,符合常规冻精输精标准,但由于蓝狐精子冻融后在37℃条件下精子存活时间及生存指数过低,导致试验15只蓝狐只有1只产崽,冻精输精受孕率只有6.7%。
牛迪,郭敏,刘艳军,张磊,巩元芳,刘铮铸[5]（2018）在《低温保存蓝狐精液稀释剂配方筛选》文中进行了进一步梳理为了获取低温保存蓝狐精液的最适稀释剂,试验设计了3种不同精液稀释剂配方,并与常用稀释剂进行对比,1组为对照组,2组为0.5×（G+柠）组,3组为（G+柠）组,4组为2×（G+柠）组,G为葡萄糖,柠为柠檬酸钠溶液。分别在4℃存放0,12,24,36,48 h后检测精子活率。结果表明:在保存温度为4℃的情况下,存放0小时时,第4组的精子活率最高,与其他各组差异显着（P<0.05）;存放12小时时,不同稀释剂的精子活率差异不显着（P>0.05）;存放24小时时,第2组的精子活率最高,但与其他各组差异不显着（P>0.05）;存放36小时时,第2组的精子活率最高,与第3组、第4组差异显着（P<0.05）,与第1组差异不显着（P>0.05）;存放48小时时,第2组的精子活率最高,与其他各组差异显着（P<0.05）。
许红喜,赵晏,卫喜明,宋伟红,赵列平,张洪涛,韩欢胜,甘文平[6]（2017）在《不同稀释液冷冻狐狸精子的研究》文中进行了进一步梳理针对Tris-柠檬酸卵黄冷冻稀释液、进口冷冻稀释液加卵黄和Tris-柠檬酸植物蛋白冷冻稀释液冷冻狐狸精子,做了2方面的试验研究。试验1,比较3种冷冻保护稀释液的冷冻后精子活力试验;试验2,3种冷冻保护稀释液冷冻精子后,解冻,比较3种冷冻保护稀释液精子的存活时间。试验结果表明:冷冻试验,进口稀释液加卵黄冷冻蓝狐精子在解冻后活力效果最佳,畸形精子少;植物源性稀释液在显微镜下的视野清晰度要高于含卵黄的稀释液;存活试验,在35.5℃水浴中存放4h后观察,精子在3种冷冻保护稀释液中的活力存在显着差异。
木沙·托合提[7]（2017）在《塔里木兔精液采集及其保存方法的研究》文中研究说明塔里木兔（Lepus yarcandensis）是我国特有物种,为国家二级保护动物。近年,南疆部分区域对林业及农业的危害逐年加重。然而,近年国内野兔需求市场日趋火爆,偷捕盗猎、非法倒卖时有发生并呈上升趋势。为满足市场对塔里木兔的需求,减轻野生种群的压力,通过驯养繁殖,实现保护与利用紧密结合。但塔里木兔野性强、个体小、自然繁殖率低,且其繁殖机理不明、人工繁殖技术研究尚属空白。塔里木兔精液采集及其保存方法的研究,为“精子库的建立”及人工授精技术体系的建立提供试验数据参考。本研究以塔里木兔为试验对象,采用现代动物繁殖技术手段,研究塔里木兔精液采集及其保存方法,本研究包括以下6部分内容:1.筛选适合塔里木兔麻醉保定药物种类及剂量。采用3种麻醉保定药物（速眠新Ⅱ、戊巴比妥钠、乌来糖）,按不同剂量进行药物保定,检测麻醉所需时间、麻醉持续时间、麻醉状态、不良反应等指标,探讨不同麻醉保定药物及其剂量对塔里木兔麻醉效果的影响。结果表明,3种麻醉药物均能有效诱导塔里木兔麻醉,其中速眠新Ⅱ（0.05 mL/kg）的麻醉效果较好,麻醉所需时间为6.3 min,麻醉持续时间为47 min,无不良反应,肌肉注射,且简单易行;其次为戊巴比妥钠（0.9 mL/kg）,麻醉所需时间为7.3 min,麻醉持续时间为63 min,会发生不良反应,肌肉注射会产生局部麻醉,需静脉注射;乌来糖（3.0 mL/kg）,麻醉所需时间为5.0 min,麻醉持续时间为35 min,会发生不良反应,肌肉注射会产生局部麻醉,需静脉注射。2.筛选适合塔里木兔人工采精方法。采用不同采精方法（解剖取精法、电刺激法、按摩法）进行精液采集,检测采精量、精子活力、精子密度等指标,探讨不同采精方法对塔里木兔精液采集效果的影响。结果表明,3种采精方法均能采集到精液,其中按摩法采精法效果最佳,采精量较高达0.20 mL、精子活力平均为0.65以上、且操作简单易行;其次为电刺激法,最佳射精电压为0.1-3.0 V、采精量达0.15 mL、精子活力平均为0.45以上,但操作繁琐技术要求较高;与其相比解剖取精法虽精子活力平均为0.73以上,但需要屠宰公兔。3.筛选适合塔里木兔精液保存稀释液。公兔精液采用不同稀释液（生理盐水、配方1、2、3、4）按1:5比例稀释后,在室温（20-25℃）条件下保存,并在不同时间点（0、4、8 h）采样,检测精子活力、畸形率、质膜完整率等指标,通过持续保存法检测精子存活时间,探讨不同稀释液对塔里木兔精液保存效果的影响。结果表明,塔里木兔精液在5种稀释液中保存,随着保存时间的延长精子活力和质膜完整率逐渐下降（P<0.05）,精子畸形率上升（P<0.05）;精子在不同稀释液中保存8 h时,各试验组精子活力极显着高于对照组（生理盐水组）（0.74、0.76、0.68、0.69对0）（P<0.01）,但各试验组之间无显着性差异（P>0.05）;配2的精子存活时间最长（41 h）,显着高于配1（37 h）、配3（30 h）、配4（28 h）（P<0.05）,但配3与配4之间无显着性差异（P>0.05）。4.筛选塔里木兔精液保存稀释液pH值。采用前一个试验所筛选的稀释液（配2）pH调至6.2、7.2、8.2,在室温（20-25℃）条件下保存,并在不同时间点（0、4、8 h）采样,检测精子活力、畸形率、质膜完整率等指标,通过持续保存法检测精子存活时间,探讨稀释液pH值对塔里木兔精液保存效果的影响。结果表明,塔里木兔精液在不同pH值培养液中保存,随着保存时间的延长精子活力、质膜完整率逐渐下降（P<0.05）,精子畸形率逐渐升高（P<0.05）;pH 7.2组精子活力,在保存4、8 h时,极显着高于pH 6.2和pH 8.2组（0.74、0.73对0、0.26）（P<0.01）;pH 7.2组,精子存活时间最长（42 h）,极显着高于pH 6.2（2.5 h）、pH 8.2组（6 h）（P<0.01）。5.筛选塔里木兔精液保存方法。采用前一个试验所筛选的稀释液（配2,pH 7.2）,在不同条件即低温（4-5℃）、室温（20-25℃）、恒温（37℃）下保存,并在不同时间点（0、4、8 h）采样,检测精子活力、畸形率、质膜完整率等指标,通过持续保存法检测精子存活时间,探讨不同保存方法对塔里木兔精液保存效果的影响。结果表明,塔里木兔精子在不同保存条件下保存,随着保存时间的延长精子活力、质膜完整率逐渐下降（P<0.05）,精子畸形率逐渐升高（P<0.05）;低温和常温保存组精子活力,在4、8 h时,极显着高于恒温保存组（0.81、0.78对0.45;0.71、0.76对0.31）（P<0.01）,但低温和常温保存组之间无显着性差异（P>0.05）;常温保存组精子存活时间最长（40 h）显着高于低温保存组（32 h）（P<0.05）,极显着高于恒温保存组（13 h）（P<0.01）。6.精液保存稀释液的人工授精试验验证。塔里木兔精液,分别在5种精液保存常用的稀释液（生理盐水、配方1、2、3、4）中常温（20-25℃）保存2 h后进行人工授精,并与自然交配进行对比,记录受胎率及平均产仔数等指标,探讨不同稀释液对塔里木兔受胎及产仔效果的影响。结果表明,圈养塔里木兔自然交配受胎率为60%,均高于其它组（P<0.05）,生理盐水、配方1、2、3、4组受胎率分别为20%、30%、40%、30%、30%、其中配方2的受胎效果较高达40%。
刘应竹[8]（2017）在《不同发情期蓝狐精液超低温保存研究》文中研究说明精液的超低温保存技术,在动物种质资源保护及优良种源繁育方面有着巨大的潜力。为了研究蓝狐行之有效的精液保存方法,提高精液品质及人工授精技术的效率,本研究对20只公狐不同发情期的精液进行了超低温冷冻保存并作了相关指标检测。结果表明,蓝狐精子活力、质膜完整率及顶体完整率等特性,均为发情中期最高（60.9%、56.4%、58.9%）,发情中期与发情初期相比,精子活力、质膜完整率及顶体完整率分别增加16.7（P<0.05）、10.1（P<0.05）、9.1（P<0.01）个百分点;从输精效果来看,发情中期,授精准胎率平均达到了79.9%,其他各组的准胎率为发情初期48.5%、发情后期65.6%和发情末期36.9%。超低温保存效果与精液品质呈正相关,精液品质越高,低温保存效果越好。
程丽芳[9]（2016）在《性别决定技术在银狐养殖产业中的应用研究》文中进行了进一步梳理狐狸属于哺乳纲,食肉目,犬科动物。我国的狐狸养殖业主要分布在北方较寒冷的地区,如：河北、山东、内蒙古、东北等地。银狐又叫银黑狐,是赤狐的一种基因突变种,被毛呈黑白相间,且有一层雾状形的针毛,是人们饲养的珍贵毛皮动物主要品种之一。安徽省皖北有多家狐狸养殖企业,这些企业在狐狸养殖过程中,一般采用的是自然繁殖的方式,狐狸发情期短,一年只有两个个月左右的发情期,并且繁殖率低,每胎只能产2-3只后代,自然繁殖方式难以满足狐狸养殖产业高速扩大再生产的需要。随着人工授精技术的发展,授精技术越来越成熟,虽然繁殖率得到了大大的提高,但相比貉子等皮毛动物产率仍然低很多,加之保胎也困难很多,怎样提高养狐业的繁殖率,这是最受人们关注的。养殖产业中母狐的需求量往往不能被满足,提高母狐的产量是养殖厂扩大再生产的关键。如果能在受精前做好性别分离,将会大大节约资源和时间,提高性别控制与鉴定和胚胎移植的效率。本文以皖北银狐为研究对象,探究皖北银狐精子发生的过程与季节影响、皖北银狐的精液品质、提高精子常温液态保存效果、输精前对X精子进行筛选,从这几环节来提高狐狸的繁殖率,最终通过动物实验,将性别决定技术应用在银狐养殖产业。为银狐人工繁殖受精率奠定基础,进而满足狐狸养殖产业扩大再生产的需要。通过研究得出的结论主要有以下几个方面：1.分析了季节对皖北地区银狐精子发生的影响,表明精子发生呈现典型的季节性,从而确定了采集公狐精液的最佳时间段。以9月、11月、次年1月份的银狐睾丸为研究对象,测量睾丸的重量、体积等基础形态参数以及采用酶联吸附实验测睾丸中睾酮的含量。利用组织切片技术分析曲细精管中各类生精细胞的组成及比例。结果：9月、11月、次年1月银狐睾丸的重量分别为0.896±0.002g、3.365±0.081 g、5.241±0.100 g,体积分别为1.215±0.036 cm3、5.558±0.794cm3、14.112±2.8543 cm3,睾酮含量分别为1.215±0.036μg、5.558±0.794μg、14.112±2.8543μg。结果表明,不同月份银狐睾丸的体积、重量以及睾酮含量有显着差异（P<0.05）,并且睾丸中睾酮的含量与重量的变化呈正相关,相关系数为0.991。切片上曲细精管中生精细胞的组成、数量随着季节变化也呈现不同,差异性显着（P<0.05）。2.从分析皖北银狐精液品质入手,配制了一种安全、高效、经济的银狐精子稀释液,延长了精子在体外的存活时间,提高了人工授精时母狐的受孕率和单胎产胎数。结果显示,皖北银狐的射精量在0.5-1.5 m1/次,精子密度在5亿/ml左右。母狐子宫的精子容纳量为0.5 m1左右。实验证明将精液进行稀释,稀释5倍左右并不会对受孕率以及受孕胎数造成影响,而稀释液质量的好坏则直接影响精子的活率和活力,进而影响银狐繁殖率。本研究配制了一种优质银狐常温保存的精子稀释液。以貂、人等其他动物精子稀释液成分为基础,配制出三种液态保存精子稀释液,在细胞水平上观测稀释液的保存效果,确定了最优的配方配制方法：配制100 m1稀释液,称量三羟甲基氨基甲烷2.13 g、柠檬酸1.24 g、D果糖0.71g、双蒸水80 ml、卵黄液10 ml、Ham’s F-10 10ml和青霉素7万IU,混合均匀。实验组15只母狐用本稀释液稀释精液受孕,平均产下的小仔数为6.5±1.5只；对照组使用养殖场购买的稀释液,185只母狐平均产仔数为4.5±1.5只,差异显着。结果表明用本精液稀释液来稀释精液,银狐可以产出更多的后代。3.建立起一种优选的X精子分离技术,取得了一定成效,提高了雌雄比例,为提高狐狸的繁殖率提供了依据。以银狐为研究对象,利用优化的梯度离心沉积法分离X精子,再在细胞水平上鉴定X精子的比率,最后进行人工授精使母狐受孕。通过产下的狐狸小仔数以及性别比例与常规人工授精方法做比较。利用本性别决定技术分离出的X精子,给10只母狐人工授精后,产出72只后代,其中雌性后代61只,占总后代数的84.7%,对照组雌性后代占51.6%。
张磊,李英杰,张文香,冯敏山,吴建华,张洪伟,刘铮铸,巩元芳,郭秀玲,陆奇玉[10]（2016）在《狐狸人工授精技术研究进展》文中研究表明狐狸是世界上经济价值较高的一种毛皮动物,但在繁殖方面属于季节性单次发情,即1年只繁殖1次,若错过发情期,将导致母狐空怀1年,直接限制狐狸的繁殖潜力,严重影响狐狸产业的发展。目前,在提高狐狸繁殖力方面,人工授精技术发挥了重要作用。本文对狐狸人工授精技术的优点、影响因素及其在生产上的发展和应用等简要综述,旨在为以后的生产实践提供参考。
二、蓝狐人工授精及精液冷冻技术研究与应用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、蓝狐人工授精及精液冷冻技术研究与应用（论文提纲范文）
（1）牛磺酸对湖羊精液常温保存效果的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 湖羊的起源与特性 |
| 1.2 AI技术的研究 |
| 1.3 绵羊精液常温保存技术概况 |
| 1.3.1 绵羊精液常温保存的原理 |
| 1.3.2 绵羊精液常温保存的影响因素 |
| 1.3.3 绵羊精液常温保存稀释液的主要成分及作用 |
| 1.4 稀释液中抗氧化剂的研究 |
| 1.4.1 酶类抗氧化剂 |
| 1.4.2 非酶类抗氧化剂 |
| 1.4.3 Tau |
| 1.5 研究意义与目的 |
| 1.5.1 本研究的意义 |
| 1.5.2 本研究的目的 |
| 第2章 湖羊精液常温保存稀释液的研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.1.3 测定指标 |
| 2.1.4 统计分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 五种稀释液配方对湖羊精子活率的影响 |
| 2.2.2 五种稀释液配方对湖羊精子活力的影响 |
| 2.2.3 五种稀释液配方对湖羊精子运动参数的影响 |
| 2.2.4 五种稀释液配方对湖羊精子存活时间的影响 |
| 2.2.5 五种稀释液配方对湖羊精子质膜完整率的影响 |
| 2.2.6 五种稀释液配方对湖羊精子顶体完整率的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 研究结论 |
| 第3章 湖羊精液常温保存效果的研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 试验方法 |
| 3.1.3 测定指标 |
| 3.1.4 统计分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 不同温度对湖羊精子活率的影响 |
| 3.2.2 不同温度对湖羊精子活力的影响 |
| 3.2.3 不同温度对湖羊精子运动参数的影响 |
| 3.2.4 不同温度对湖羊精子存活时间的影响 |
| 3.2.5 不同温度对湖羊精子质膜完整率的影响 |
| 3.2.6 不同温度对湖羊精子顶体完整率的影响 |
| 3.2.7 不同温度对湖羊精子ROS含量的影响 |
| 3.2.8 不同温度对湖羊精液中MDA含量的影响 |
| 3.2.9 不同温度对湖羊精子SOD活力的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 研究结论 |
| 第4章 Tau对湖羊精液常温保存的研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验材料 |
| 4.1.2 试验方法 |
| 4.1.3 测定指标 |
| 4.1.4 统计分析 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 Tau对湖羊精子活率的影响 |
| 4.2.2 Tau对湖羊精子活力的影响 |
| 4.2.3 Tau对湖羊精子运动参数的影响 |
| 4.2.4 Tau对湖羊精子质膜完整率的影响 |
| 4.2.5 Tau对湖羊精子顶体完整率的影响 |
| 4.2.6 Tau对湖羊精子ROS含量的影响 |
| 4.2.7 Tau对湖羊精液中MDA含量的影响 |
| 4.2.8 Tau对湖羊精子SOD活力的影响 |
| 4.2.9 Tau对湖羊精液中CAT活力的影响 |
| 4.2.10 Tau对湖羊精液T-AOC的影响 |
| 4.2.11 Tau对湖羊精子线粒体膜电位的影响 |
| 4.2.12 常温保存2d的精液对湖羊受胎率的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 研究结论 |
| 全文结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
（2）蓝狐精液冷冻前后精子运动状态及超微结构变化（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 精液采集及分组 |
| 1.2 试验仪器及试剂 |
| 1.3 精子的动力分析 |
| 1.4 电镜样品制备 |
| 1.5 精子的冷冻 |
| 1.5.1 精子稀释 |
| 1.5.2 细管冻精的制备及解冻 |
| 1.6 数据的统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 精子的运动性 |
| 2.2 蓝狐精子冷冻前后的精子超微结构 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
（3）蓝狐细管冻精标准化生产技术的研究（论文提纲范文）
| 1 狐狸精液保存技术的概述及人工授精的优越性 |
| 2 狐狸精液冷冻保存的现状及技术壁垒 |
| 3 蓝狐细管冻精标准化生产技术程序 |
| 3.1 良种公蓝狐的引进与精液采集 |
| 3.2 精液品质检查 |
| 3.3 精液冷冻稀释液的配制 |
| 3.4 精液稀释、降温与平衡 |
| 3.5 精液品质抽检 |
| 3.6 分装、封口 |
| 3.7 冷冻与保存 |
| 3.8 抽样解冻,检查活力 |
| 3.9 冻精日常保管 |
| 3.10 冻精运输 |
| 4 细管冷冻精液人工授精实验 |
| 4.1 狐狸发情鉴定 |
| 4.2 冻精解冻与装枪 |
| 4.3 输精 |
（4）蓝狐精液冷冻及冷冻前后精子超微结构变化（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 精液冷冻技术研究进展 |
| 1.2.1 精液冷冻技术发展史 |
| 1.2.2 犬科动物精液冷冻技术的发展 |
| 1.2.3 狐精液冷冻技术研究进展 |
| 1.3 精液冷冻原理及冷冻工艺 |
| 1.3.1 精液冷冻原理 |
| 1.3.2 精液冷冻工艺 |
| 1.4 精子形态 |
| 1.4.1 精子头部形态 |
| 1.4.2 精子颈部形态 |
| 1.4.3 精子尾部形态 |
| 1.4.4 电镜技术在精子超微结构研究中的应用 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 试验器材及试验药品 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 精液采集 |
| 2.2.2 精液预处理 |
| 2.2.3 精液质量检测 |
| 2.2.4 精液冷冻 |
| 2.2.5 精子运动性检测 |
| 2.2.6 透射电镜样品制备 |
| 2.2.7 冷冻精液输精 |
| 3 试验结果 |
| 3.1 蓝狐精液冷冻稀释液选取 |
| 3.2 冷冻前后蓝狐精子运动性检测及超微结构变化 |
| 3.2.1 精子运动性检测 |
| 3.2.2 蓝狐精子冷冻前后精子超微结构 |
| 3.3 冷冻精液输精试验 |
| 4 讨论 |
| 4.1 最佳冷冻稀释液选取 |
| 4.2 冷冻前后精子运动性与精子超微结构变化 |
| 4.3 冻精输精试验 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
| 附件 |
（5）低温保存蓝狐精液稀释剂配方筛选（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 精液的采集 |
| 1.2 试验仪器设备 |
| 1.3 稀释液配方与分组保存 |
| 1.4 精子的观察及活率的计算 |
| 1.5 数据的统计与处理 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
（6）不同稀释液冷冻狐狸精子的研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 精液来源 |
| 1.2 仪器与试剂 |
| 1.3 冷冻稀释液配方 |
| 1.4 不同稀释液冷冻蓝狐精子冷冻试验 |
| 1.5 不同稀释液配方冷冻蓝狐精子存活试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同冷冻稀释液冷冻蓝狐精子结果 |
| 2.2 不同稀释液配方冷冻蓝狐精子存活试验结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 不同冷冻稀释液冷冻蓝狐精子试验 |
| 3.2 不同稀释液配方冷冻蓝狐精子存活试验 |
（7）塔里木兔精液采集及其保存方法的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.1.1 塔里木兔生态习性 |
| 1.1.2 塔里木兔繁殖特性 |
| 1.1.3 塔里木兔资源现状 |
| 1.1.4 国内塔里木兔驯养繁育现状 |
| 1.2 哺乳动物精液采集及其保存技术研究进展 |
| 1.2.1 哺乳动物常用麻醉药物的应用及研究现状 |
| 1.2.2 哺乳动物精液采集技术的应用及研究现状 |
| 1.2.3 哺乳动物精液保存技术的研究进展 |
| 1.2.4 哺乳动物精液稀释液的研究现状及进展 |
| 1.2.5 兔精液保存效果的影响因素 |
| 1.2.6 兔人工授精技术的研究现状 |
| 1.3 研究目的及意义 |
| 1.4 技术路线 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 主要仪器及药品 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 试验动物的麻醉 |
| 2.2.2 精液的采精 |
| 2.2.3 精液的稀释 |
| 2.2.4 精液的保存 |
| 2.2.5 精液稀释液的配制 |
| 2.2.6 精液质量的检测 |
| 2.2.7 人工授精 |
| 2.2.8 自然配种 |
| 2.2.9 受胎率的评价 |
| 2.3 试验设计与分组 |
| 2.3.1 适宜塔里木兔麻醉药种类及剂量的筛选 |
| 2.3.2 适宜塔里木兔人工采精方法的筛选 |
| 2.3.3 适宜塔里木兔精液稀释液的筛选 |
| 2.3.4 适宜塔里木兔精液稀释液pH值的筛选 |
| 2.3.5 适宜塔里木兔精液保存方法的筛选 |
| 2.3.6 精液稀释液的人工授精试验验证 |
| 2.4 统计分析 |
| 第3章 结果与分析 |
| 3.1 麻醉药种类及剂量对塔里木兔麻醉效果的影响 |
| 3.2 不同采精方法对塔里木兔采精效果的影响 |
| 3.2.1 解剖取精法对塔里木兔采精效果的影响 |
| 3.2.2 电刺激法对塔里木兔采精效果的影响 |
| 3.2.3 按摩法对塔里木兔采精效果的影响 |
| 3.3 不同稀释液对塔里木兔精液保存效果的影响 |
| 3.3.1 不同稀释液对塔里木兔精子活力及存活时间的影响 |
| 3.3.2 不同稀释液对塔里木兔精子畸形率的影响 |
| 3.3.3 不同稀释液对塔里木兔精子质膜完整率的影响 |
| 3.4 稀释液PH值对塔里木兔精液保存效果的影响 |
| 3.4.1 稀释液pH值对精子活力及存活时间的影响 |
| 3.4.2 稀释液pH值对塔里木兔精子畸形率的影响 |
| 3.4.3 稀释液pH值对塔里木兔精子质膜完整率的影响 |
| 3.5 不同保存方法对塔里木兔精液保存效果的影响 |
| 3.5.1 不同保存方法对塔里木兔精子活力及存活时间的影响 |
| 3.5.2 不同保存方法对塔里木兔精子畸形率的影响 |
| 3.5.3 不同保存方法对塔里木兔精子质膜完整率的影响 |
| 3.6 不同稀释液对塔里木兔受胎及产仔效果的影响 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 麻药剂量及其种类对塔里木兔麻醉效果的影响 |
| 4.2 不同采精方法对塔里木兔采精效果的影响 |
| 4.3 不同稀释液对塔里木兔精液保存效果的影响 |
| 4.4 不同PH值对塔里木兔精液保存效果的影响 |
| 4.5 不同保存方法对塔里木兔的精液保存效果的影响 |
| 4.6 不同稀释液对塔里木兔受胎率的影响 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（8）不同发情期蓝狐精液超低温保存研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 精液来源及品质 |
| 1.2 精子冷冻 |
| 1.2.1 精液稀释 |
| 1.2.2 细管冻精制备及解冻 |
| 1.2.3 电镜样品的制备及检测 |
| 1.2.4 冻融前后精子质量测定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同发情期蓝狐精子解冻后活力、质膜完整率及顶体完整率(%) |
| 2.2 蓝狐冷冻精液人工授精 |
| 3 结论与讨论 |
（9）性别决定技术在银狐养殖产业中的应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 1 狐狸 |
| 1.1 银狐的起源 |
| 1.2 银狐的生物学特性 |
| 2 性别决定技术概述 |
| 2.1 性别决定在银狐养殖业的意义 |
| 2.2 性别决定技术的发展 |
| 3 研究的目的、意义和方法 |
| 3.1 研究的目的和意义 |
| 4 研究内容 |
| 4.1 实验基地 |
| 4.2 研究内容 |
| 4.3 研究特点 |
| 第一章：季节对银狐精子发生的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试剂及仪器设备 |
| 1.3 睾丸获取 |
| 1.4 睾酮的测定 |
| 1.5 石蜡组织切片 |
| 1.6 数理统计 |
| 2 结果 |
| 2.1 睾丸体积及重量 |
| 2.2 睾丸中睾酮的含量 |
| 2.3 曲细精管中生精细胞的分布 |
| 2.4 附睾中精子数量 |
| 3 讨论 |
| 第二章：银狐精液参数测定及精子稀释液配制 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 银狐精液参数 |
| 2.2 不同精液稀释液体外对精子活率的影响 |
| 2.3 精液稀释液的人工授精效果检测 |
| 3 讨论 |
| 第三章：银狐X精子分离及在产业化中的基础应用研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验地点 |
| 1.2 精液采集 |
| 1.3 实验材料与配制方法 |
| 1.4 精液参数的常规分析 |
| 1.5 流式细胞术分离X精子 |
| 1.6 密度梯度离心分离X精子 |
| 1.7 X精子占比分析 |
| 1.8 人工授精 |
| 1.9 数理统计 |
| 2 结果 |
| 2.1 流式细胞术分离X精子 |
| 2.2 密度梯度离心分离出X精子的占比 |
| 2.3 人工授精 |
| 3 讨论 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
（10）狐狸人工授精技术研究进展（论文提纲范文）
| 1 狐人工授精技术的优点 |
| 1. 1 提高种公狐利用率,节省饲养成本,增加收益 |
| 1. 2 品种改良的有效手段 |
| 1. 3 减少疾病传播 |
| 2 影响狐狸精液品质的因素 |
| 2. 1 个体的影响 |
| 2. 2 年龄和体况的影响 |
| 2. 3 环境的影响 |
| 2. 4 营养的影响 |
| 2. 5 采精方面的影响 |
| 2. 5. 1 采精技术对精液品质的影响 |
| 2. 5. 2 采精阶段和采精频率对精液品质的影响 |
| 3 狐狸人工授精技术的发展和应用 |
| 3. 1 国内外狐人工授精技术的发展 |
| 3. 2 狐鲜精授精技术与效果 |
| 3. 3 狐冷冻精液授精技术与效果 |
| 4 展望 |
四、蓝狐人工授精及精液冷冻技术研究与应用（论文参考文献）
- [1]牛磺酸对湖羊精液常温保存效果的研究[D]. 张柳明. 扬州大学, 2021(09)
- [2]蓝狐精液冷冻前后精子运动状态及超微结构变化[J]. 吴汝梓,郝芯缈,刘志平,韩欢胜. 黑龙江畜牧兽医, 2019(23)
- [3]蓝狐细管冻精标准化生产技术的研究[J]. 尚成志,李明,于新生,王冠菊,鲍亚萍,宝力朝鲁,李勇. 现代畜牧科技, 2019(11)
- [4]蓝狐精液冷冻及冷冻前后精子超微结构变化[D]. 吴汝梓. 东北林业大学, 2019(01)
- [5]低温保存蓝狐精液稀释剂配方筛选[J]. 牛迪,郭敏,刘艳军,张磊,巩元芳,刘铮铸. 黑龙江畜牧兽医, 2018(06)
- [6]不同稀释液冷冻狐狸精子的研究[J]. 许红喜,赵晏,卫喜明,宋伟红,赵列平,张洪涛,韩欢胜,甘文平. 现代化农业, 2017(10)
- [7]塔里木兔精液采集及其保存方法的研究[D]. 木沙·托合提. 新疆农业大学, 2017(02)
- [8]不同发情期蓝狐精液超低温保存研究[J]. 刘应竹. 国土与自然资源研究, 2017(02)
- [9]性别决定技术在银狐养殖产业中的应用研究[D]. 程丽芳. 安徽大学, 2016(10)
- [10]狐狸人工授精技术研究进展[J]. 张磊,李英杰,张文香,冯敏山,吴建华,张洪伟,刘铮铸,巩元芳,郭秀玲,陆奇玉. 畜牧与兽医, 2016(02)