外源性降钙素基因相关肽预防新生大鼠内皮素-1所致肺出血的实验研究

一、外源性降钙素基因相关肽预防内皮素-1致新生鼠肺出血的实验研究（论文文献综述）

李小乐,黄萍,陈玉君^[1]（2012）在《低温低氧对新生鼠肺组织内皮素受体表达的影响》文中进行了进一步梳理目的:研究低温低氧因素对新生鼠肺组织内皮素受体A mRNA（endothelin receptor A mRNA,ETA mRNA）和内皮素受体B mRNA（endothelin receptor B mRNA,ETB mRNA）表达的影响,并探讨两种受体在肺出血发生过程中的作用。方法:日龄5～7d的Wistar新生鼠,随机分为正常组（C）、低氧组（H1）、低温组（H2）和低温低氧组（H3）。C组置室温空气中,H1组给予低氧干预（FiO25%～6%）6h,H2组置低温环境中[温度（10±1）℃]6h,H3组置低温低氧环境中6h（干预条件同上）。各组开胸取肺,观察大体改变,切片HE染色观察病理学改变,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ-RT-PCR）方法检测肺组织中ETA mRNA、ETB mRNA的表达情况。结果:与C组比较,ETA mRNA在H1组、H2组、H3组表达增强（H1、H2组P<0.05,H3组P<0.01）;ETB mRNA在H1组、H2组、H3组表达也增强（与C组比较,H1、H3组P<0.01,H2组P<0.05）。结论:在低温和（或）低氧下,ETA通过表达增强加重了内皮素-1（ET-1）的损伤作用,而ETB通过表达增强减轻ET-1的损伤作用,两者分别通过损伤和保护机制参与了肺出血的发生。

孙振涛^[2]（2012）在《降钙素基因相关肽基因导入对脑死亡大鼠的肺保护作用》文中研究表明脑死亡是指包括脑干在内的全脑机能丧失的不可逆性病理状态,脑死亡可导致肺损伤,肺损伤引起的氧合不足将直接影响到其他器官的功能和保护,探讨脑死亡肺损伤的机制,对预防和治疗脑死亡肺损伤具有重要意义。降钙素基因相关肽（Calcitonin gene-related peptide, CGRP）广泛存在于神经系统、血管、肺脏等多种组织中,是一种具有血管舒张、心肌正性变力变时、肺保护、脑保护以及免疫调节作用等多种生物学功能的多肽。研究发现颅脑损伤后机体内CGRP含量发生改变,并且和颅脑损伤的严重程度相关,但脑死亡后CGRP的含量改变和脑死亡肺损伤发生发展的关系尚不明确。基于“脑死亡后机体CGRP含量发生改变,进而参与了脑死亡后肺损伤的发生和发展”的假设。本实验拟首先采用缓慢间断颅内加压法建立大鼠脑死亡模型,然后采用放射免疫法,RT-PCR,免疫印迹（Western blot）等实验方法观察脑死亡不同时间点大鼠血浆CGRP及内皮素-1（Endothelin-1, ET-1）含量变化及肺组织中CGRP的mRNA水平及蛋白表达,分析其与脑死亡后肺损伤的关系,探讨CGRP在脑死亡后的变化规律及其对脑死亡后肺损伤的影响与机制,为脑死亡后肺损伤的预防和治疗提供思路。进而在建立脑死亡模型时静脉给予外源性CGRP,采用放射免疫法,酶联免疫吸附实验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA）, RT-PCR, Western blot,免疫组织化学等实验方法观察CGRP对脑死亡大鼠血浆肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α, TNF-α）、白细胞介素-1β（Interleukin-1β, IL-1β）、白细胞介素-6（Interleukine-6, IL-6）等炎症因子水平及肺组织中丙二醛（Malondialdehyde, MDA）含量和超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, SOD）活性的影响及对肺组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（y-glutamylcysteine Synthetase,γ-GCS）、水通道蛋白-1 （Aquaporin Protein-1, AQP-1）、CGRP的mRNA水平及蛋白表达的影响。同时观察静脉给予外源性CGRP后对肺组织形态的影响,探讨CGRP的肺保护作用及其可能机制。因为外源性CGRP在体内迅速灭活,代谢快、作用时间短,而构建CGRP重组腺病毒载体气管导入具有不整合入宿主细胞基因组,安全方便,作用时间长等优点,理论上可对脑死亡肺损伤起到更好的保护作用。所以,拟在以上实验的基础上,通过气管导入带有增强型绿色荧光蛋白标记的降钙素基因相关肽重组腺病毒载体（Ad5-CGRP-EGFP）,然后观察CGRP基因转染后大鼠肺组织CGRP mRNA水平和蛋白表达水平及CGRP基因治疗对肺组织γ-GCS, AQP-1等mRNA水平和蛋白表达的影响,对肺组织MDA含量、SOD活力,肺水含量、肺组织结构的影响,以及对血浆TNF-α、IL-1β、IL-6含量的影响,并探讨CGRP基因治疗在脑死亡大鼠肺保护中的作用及机制。本研究拟观察脑死亡后CGRP的变化规律及其和脑死亡肺损伤的关系,并通过CGRP基因导入观察CGRP基因治疗对脑死亡大鼠的肺保护作用并探讨其可能机制,为脑死亡肺损伤的预防及基因靶向治疗提供理论依据。本研究共分以下3个部分。第一部分脑死亡大鼠CGRP表达变化与脑死亡肺损伤1方法1.1健康Wistar大鼠20只,雌雄不限,体重250-300g,SPF级,将动物随机分为2组,即对照组（A组）、脑死亡组（B组）,每组10只。B组麻醉后行股动脉股静脉插管、气管插管及颅骨钻孔置管,硬脑膜外导管颅内缓慢加压建立脑死亡模型；A组麻醉后操作同B组,但不行硬脑膜外导管颅内加压。分别在麻醉后15min（T0）、脑死亡即刻（T1）、脑死亡2h时点（T2）、脑死亡6h时点（T3）、脑死亡12h时点（T4）留取血液标本并于脑死亡12h时点留取肺组织标本。1.2采用放射免疫法分别检测不同时点血浆CGRP、ET-1含量变化。脑死亡12h时点留取肺组织,测定肺系数和肺水含量,苏木素-伊红（HE）染色观察肺脏组织结构变化。RT-PCR方法检测肺组织中CGRP mRNA; Western blot方法测肺组织CGRP蛋白。1.3统计学处理：所有数值变异均采用均数±标准差（X±s）表示,应用SPSS 16.0统计分析软件,采用重复测量数据的方差分析、单因素方差分析等分析方法进行统计学处理,显着性检验水准取α=0.05。2结果2.1血压和心率变化：A组在整个实验过程中血压和心率无明显变化（P>0.05）；B组在颅内加压过程中血压增高,心率先慢后快,B组血压在T1及以后各时点较T0时点低,B组心率在T1及以后各时点较组内T0时点快,（P<0.05）。B组在峰值时点血压增高、心率增快,在T1及以后各时点B组血压较A组低,心率较A组快,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.2血浆CGRP变化：A组在T1时点CGRP含量较TO时点增高,在T2时点CGRP含量较脑死亡时点降低（P<0.05）,T2时点以后CGRP含量恢复正常；B组在T1时点CGRP含量较T0时点增高,T1后各时点CGRP含量与T0时点比较均降低,T4时点较T3时点CGRP含量有所回升,组内比较差异有统计学意义（P<0.05）。B组T1时点CGRP含量较A组增高,T1后各时点CGRP含量均较A组降低,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.3血浆ET-1变化：A组在T1时点及T2、T3时点ET-1含量较TO时点增高（P<0.05）,T4时点恢复正常；B组T1后各时点ET-1含量与T0时点比较均增高,组内比较差异有统计学意义（P<0.05）。B组T1后各时点ET-1含量均较A组增高,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.4肺组织CGRP mRNA水平比较B组较A组升高,肺组织CGRP蛋白表达水平B组较A组降低,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.5脑死亡大鼠肺组织常规结构变化：HE染色结果显示A组肺脏组织结构基本正常：B组出现损伤性改变。2.6肺系数及肺水含量B组均较A组增高,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。第二部分外源性CGRP对脑死亡大鼠肺损伤的影响及其机制1方法1.1健康Wistar大鼠75只,雌雄不限,体重250-300g,SPF级,将动物随机分为三组,每组25只,即对照组（A组）、脑死亡组（B组）、CGRP干预组（C组）。B、C组建立脑死亡模型；A组除不行硬脑膜外导管加压外,其余处理同脑死亡组；C组为CGRP干预的脑死亡组,于脑死亡模型建立成功后经静脉用微量输注泵给予CGRP3μg/kg,随后给与CGRP 6μg/kg持续输注维持12h。分别于麻醉后15min（TO）、脑死亡即刻（T1）、脑死亡2h时点（T2）、脑死亡6h时点（T3）、脑死亡12h时点（T4）每组随机选5只共15只大鼠抽取血液标本并取肺标本。1.2采用ELISA法测定各时点血浆TNF-α、IL-1β、IL-6含量；采用放射免疫法分别检测各时点血浆CGRP、ET-1含量变化；T4时点留取肺组织,硫代巴比妥钠法测定肺匀浆中MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定肺组织中SOD活性,分析天平测定肺系数和肺水含量,HE染色观察肺脏组织结构变化；RT-PCR方法检测T1、T3、T4时点肺组织中γ-GCS、AQP-1、CGRPmRNA; Western blot方法测T1、T3、T4时点肺组织γ-GCS、AQP-1、CGRP蛋白表达。1.3统计学处理：所有数值变异均采用均数±标准差（X±s）表示,应用SPSS 16.0统计分析软件,采用重复测量数据方差分析、单因素方差分析等进行统计学处理,显着性检验水准取α=0.05。2结果2.1血压和心率变化：A组在整个实验过程中血压和心率无明显变化（P<0.05）；B组、C组在颅内加压过程中血压增高,心率增快,B组、C组血压在T1及以后各时点较T0时点低,B组、C组心率在T1及以后各时点较组内TO时点快,（P<0.05）。B组、C组在峰值时点血压增高、心率增快,在T1及以后各时点B组、C组血压较A组低,心率较A组快,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.2血浆TNF-α变化：A组各时点TNF-α水平差异无统计学意义；B组、C组TNF-α水平自T2开始逐渐升高,每后一时间点与前一时间点相比差异有统计学意义（P<0.05）。TNF-α水平自T2时点开始,C组高于A组,B组高于C组和A组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.3血浆IL-1p变化：A组各时点IL-1p水平差异无统计学意义；B组、C组IL-1p水平自T2开始逐渐升高,每后一时间点与前一时间点相比差异有统计学意义（P<0.05）。IL-18水平自T2时点开始,C组高于A组,B组高于C组和A组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.4血浆IL-6变化：A组IL-6水平T2、T3、T4时点升高与T0、T1时间点比较差异有统计学意义（P<0.05）；B组、C组IL-6水平自T2开始逐渐升高,每后一时间点与前一时间点相比差异有统计学意义（P<0.05）。IL-6水平自T2时点开始,C组高于A组,B组高于C组和A组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.5血浆CGRP变化：A组在T1时点CGRP含量较T0时点增高,在T2时点CGRP含量较T1时点降低,组内比较差异有统计学意义（P<0.05）,T2时点以后CGRP含量恢复正常；B组CGRP含量在T1时点较T0时点增高,T1后各时点与TO时点比较均降低,组内比较差异有统计学意义（P<0.05）；C组CGRP含量在T1后各时点与T0时点比较均增高,组内比较差异有统计学意义（P<0.05）。B组CGRP含量T1时点较A组增高,T2后各时点均较A组降低,C组CGRP含量T1以后各时点较A组增高,T2后各时点均较B组增高,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.6血浆ET-1变化：A组ET-1含量在T1时点及T2时点较T0时点增高（P<0.05）,T3时点以后恢复正常,B组ET-1含量T1后各时点与T0时点比较均增高,C组ET-1含量T1后各时点与TO时点比较均增高,组内比较差异有统计学意义（P<0.05）。B组、C组T1后各时点ET-1含量均较A组增高, C组T2后各时点ET-1含量均较B组减低,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.7肺组织MDA含量及SOD活性：肺组织中MDA含量B组高于A组及C组,C组高于A组（P<0.05）,肺组织SOD活性B组低于A组及C组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.8肺组织γ-GCS mRNA水平B组、C组均较A组升高,C组较B组升高（P<0.05）。肺组织AQP-1 mRNA水平B组较A组降低,C组较B组、A组增高（P<0.05）。CGRP mRNA水平B组较A组升高,C组较A组降低（P<0.05）。肺组织γ-GCS、AQP-1、CGRP蛋白水平均B组较A组降低,C组较B组、A组增高,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.9脑死亡大鼠肺组织常规结构变化：HE染色结果显示A组肺脏组织结构基本正常；B组出现损伤性改变,C组出现损伤性改变较组B减轻。2.10肺系数及肺水含量B组均较A组增高,C组肺系数及肺水含量也较A组增高,但较B组降低,3组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。第三部分CGRP基因导入对脑死亡大鼠肺损伤的影响1方法1.1 Wistar大鼠50只,雌雄不限,体重250-300g,SPF级,随机分为5组,每组10只,即对照组（A组）、脑死亡组（B组）、脑死亡CGRP干预组（C组）、脑死亡空载体导入组（D组）、脑死亡CGRP基因治疗组（E组）。B组、C组、D组、E组均建立脑死亡模型；A组开颅等处理均同脑死亡组,但不行硬脑膜外导管加压。C组为CGRP干预的脑死亡组,脑死亡模型建立后经静脉用微量输注泵给予CGRP3μg/kg,随后给与CGRP 6μg/kg持续输注维持12h；D组于脑死亡模型建立后微量输注泵给予CGRP3μg/kg,同时通过气管导入空载体；E组于脑死亡模型建立后微量输注泵给予CGRP3μg/kg同时通过气管导入携带增强型绿色荧光蛋白标记的降钙素基因相关肽重组腺病毒载体（Ad5-CGRP-EGFP）。分别在麻醉后15min（T0）、脑死亡12h时点（T1）抽取血液标本,在脑死亡12h或对照组12h时点取材肺组织标本。1.2采用ELISA方法测定各时点血浆TNF-αIL-1β, IL-6水平；采用放射免疫法分别检测各时点血浆CGRP、ET-1含量；T1时点留取肺组织,荧光显微镜下检测基因转染情况,硫代巴比妥钠法测定肺匀浆中MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定肺组织中SOD活性；分析天平测定肺系数和肺水含量,HE染色观察肺脏组织结构变化,免疫组化检测肺组织γ-GCS, AQP-1蛋白表达；RT-PCR方法检测肺组织中γ-GCS、AQP-1 CGRP mRNA; Western blot方法测肺组织γ-GCS、AQP-1、CGRP蛋白表达。1.3统计学处理：所有数值变异均采用均数±标准差（X±s）表示,应用SPSS 16.0统计分析软件,采用重复测量数据的方差分析、单因素方差分析等统计学方法进行统计学处理,显着性检验水准取a=0.05。2结果2.1 A组、B组、C组未见绿色荧光反应,D组、E组肺组织标本在荧光显微镜下呈较强的绿色荧光反应,证明基因转染成功。2.2血压和心率变化：A组在整个实验过程中血压和心率无明显变化（P>0.05）；B组、C组、D组、E组在颅内加压过程中血压增高,心率增快,B组、C组、D组、E组血压在脑死亡时点及以后各时点较TO时点低,B组、C组、D组、E组心率在脑死亡及以后各时点较组内TO时点快,（P<0.05）。B组、C组、D组、E组在峰值时点血压增高、心率增快,在脑死亡时点及以后各时点B组、C组、D组、E组血压较A组低,心率较A组快,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.3血浆TNF-α、IL-1β、IL-6水平：T0时点各组TNF-α、IL-1β、IL-6水平差异无统计学意义。T1时点TNF-α、IL-1β、IL-6水平B组、D组高于E组、C组和A组,E组、C组高于A组,C组高于E组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.4血浆CGRP含量：T0时点各组血浆CGRP水平差异无统计学意义。T1时点E组血浆CGRP水平高于D组、C组、B组和A组,C组高于D组、B组和A组,A组高于D组和B组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.5血浆ET-1含量：T0时点各组血浆ET-1水平差异无统计学意义。T1时点E组低于D组、C组、B组和A组,C组低于D组、B组和A组,A组低于D组和B组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）；2.6肺组织MDA含量及SOD活性：肺组织中MDA含量B组、D组高于A组、C组和E组,C组高于E组和A组,E组高于A组（P<0.05）,肺组织SOD活性C组、E组高于A组、B组和D组,E组高于C组（P<0.05）。2.7肺组织γ-GCS mRNA水平B组、C组、D组、E组均较A组升高,C组较B组、D组升高,E组较C组升高（P<0.05）。肺组织AQP-1 mRNA水平B组、D组较A组低,C组、E组较A组高,E组较C组高（P<0.05）。肺组织CGRP mRNA水平B组、D组、E组较A组升高,C组较A组降低,E组较B组、D组高（P<0.05）。肺组织γ-GCS、AQP-1 CGRP蛋白表达水平均B组、D组较A组降低,C组、E组较A组高,E组较C组高,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.8肺组织γ-GCS、AQP-1免疫组化结果：γ-GCS、AQP-1蛋白表达B组、D组均较E组、C组和A组降低,E组、C组较A组增高,E组较C组增高,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.9脑死亡大鼠肺组织常规结构变化：HE染色结果显示A组肺脏组织结构基本正常；B组、D组出现损伤性改变,C组出现损伤性改变较B组、D组减轻,E组损伤性改变较C组轻。2.10肺系数及肺水含量：B组、D组均较E组、C组和A组高,E组、C组较A组高,E组较C组低,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论1、脑死亡大鼠血浆及肺组织CGRP含量下降,脑死亡后肺损伤和机体CGRP水平下降,TNF-α、IL-1β、IL-6等促炎因的释放增加,氧化应激增强,AQP-1表达下降等有关。2、外源性CGRP对脑死亡大鼠肺组织具有保护作用。3、CGRP基因转染脑死亡大鼠较静脉应用外源性CGRP血浆TNF-αIL-1βIL-6含量下降,肺组织MDA水平下降、SOD活力增高、AQP-1,γ-GCSmRNA和蛋白表达增加。4、CGRP基因转染较静脉应用CGRP对脑死亡大鼠具有更好的肺保护作用,其机制与降低炎症反应,抗氧化应激,增加AQP-1的表达有关。

惠毅^[3]（2012）在《基于肺病模型大鼠病理形态学及相关调控物质变化探讨“肺病及肠”病理传变规律及其机制》文中指出目的：本实验通过建立“肺病”（慢性支气管炎）动物模型,选取三个不同的时间点,观察造模后肺与大肠在病理形态学、细胞组织学、炎症介质等方面的对应性变化,探寻“肺病及肠”的传变规律及其病理传变机制。方法：选取SD大鼠,雄性,共60只。按体重随机分成空白对照（24只）和模型组（36只）。空白组大鼠置于无烟环境中饲养,模型组大鼠采用单纯烟熏法造模,每次烟熏50min,每天3次（分别在早上9点、下午2点和6点）,共烟熏70d。于首次造模第20天、50天、70天随机抽取空白组（8只）和模型组（12只）大鼠检测大鼠肺、胃肠功能；光镜观察肺、胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠组织病理形态学变化；电镜观察肺和结肠组织病理形态学改变；ELISA法检测大鼠肺、结肠组织TNF-α、IL-1β、ET-1、PGE2含量；免疫组化法检测肺、结肠组织VIP、SP、CGRP、iNOS表达。结果：1.病理生理肺功能：与空白组比较,模型组大鼠造模第20天、第50天、第70天呼吸频率增快,潮气量、每分钟通气量降低,有差异（P<0.05）或显着性差异（P<0.01）；与造模第20天比较,模型组大鼠造模第50天、第70天潮气量、每分钟通气量均降低,有显着性差异（P<0.01）。胃肠功能：与空白组比较,模型组大鼠造模第50天、第70天粪便含水率降低,有显着性差异（P<0.01）；第20天、第50天、第70天胃内残留率升高、小肠推进率降低,有显着性差异（P<0.01）；与造模第20天比较,模型组大鼠造模第50天、第70天粪便含水率降低、胃内残留率升高、小肠推进率均降低,有差异（P<0.05）或显着性差异（P<0.01）；与造模第50天比较,模型组大鼠造模第70天粪便含水率降低、胃内残留率升高、小肠推进率降低,有差异（P<0.05）或显着性差异（P<0.01）。2.病理形态学光镜：模型组大鼠造模第20天、第50天、第70天十二指肠、空肠、回肠、直肠、胃组织无明显变化；模型组大鼠肺组织于造模第20天、第50天、第70天均可见支气管广泛上皮细胞变性、坏死,不同程度炎细胞浸润：模型组大鼠结肠组织于造模第20天、第50天、第70天分别有40%、70%、80%大鼠结肠组织出现局部充血水肿,灶性上皮细胞变性、坏死,不同程度的慢性炎细胞浸润,严重者可见小灶性糜烂,黏膜上皮欠完整,腺体排列欠规则,黏膜及黏膜下炎细胞浸润；电镜：模型组大鼠造模第20天肺组织Ⅰ型肺泡上皮细胞肿胀,线粒体轻度肿胀,Ⅱ型肺泡上皮细胞增生；大鼠结肠组织超微结构病无明显改变。第50天、第70天肺组织Ⅰ型肺泡上皮细胞肿胀,线粒体重度肿胀,Ⅱ型肺泡上皮细胞增生,肺间质内胶原纤维增多、纤维母细胞活跃：大鼠结肠组织出现结肠黏膜上皮表面的微绒毛排列稀疏紊乱,线粒体肿胀,嵴排列紊乱,结肠组织黏膜下固有层间隙胶原纤维增生,见成纤维母细胞。3.相关调控物质TNF-α、IL-1β、ET-1、PGE2含量变化：与空白组比较,模型组大鼠造模第20天、第50天、第70天肺组织、结肠组织TNF-α、IL-1β、ET-1、PGE2含量明显升高,有差异（P<0.05）或显着性差异（P<0.01）；与造模第20天比较,模型组大鼠造模第50天、第70天肺组织、结肠组织TNF-α、IL-1β、ET-1、PGE2含量明显升高,有显着性差异（P<0.01）；与造模第50天比较,模型组大鼠造模第70天肺组织、结肠组织TNF-α、IL-1β、ET-1、PGE2含量明显升高,有显着性差异（P<0.01）。VIP、SP、CGRP、iNOS表达变化：与空白组比较,模型组大鼠造模第20天、第50天、第70天肺组织VIP、SP、CGRP、iNOS表达均升高（P<0.05或P<0.01）,第20天结肠组织VIP表达降低,CGRP、iNOS表达升高（P<0.05或P<0.01）,造模第50天、第70天肺组织、结肠组织VIP、SP表达降低,CGRP、iNOS表达升高（P<0.05或P<0.01）；与造模第20天比较,模型组大鼠造模第50天、第70天肺组织VIP、SP、iNOS表达升高（P<0.05或P<0.01）,模型组大鼠造模第50天结肠组织iNOS表达升高（P<0.01）,第70天结肠组织VIP、SP、CGRP、iNOS表达升高（P<0.05或P<0.01）；与造模第50天比较,模型组大鼠造模第70天肺组织VIP、CGRP、iNOS表达升高（P<0.05）,结肠组织SP、CGRP、iNOS表达升高（P<O.05或P<0.01）。结论：1.肺病大鼠可出现胃肠功能的改变,提示肺病可能传变到“肠”。2.肺病大鼠可出现大肠的病理变化,提示肺病可能传变到“肠”；肺病大鼠十二指肠、空肠、回肠、直肠、胃组织无明显病理改变,而结肠组织出现不同程度的病理改变,提示肺病传变到“肠”的主要部位可能在结肠。3.肺病大鼠可出现大肠相关调控物质的变化,提示肺病可能传变到“肠”。4.初步发现TNF-α、IL-1、ET-1、PGE2等炎症介质可能是“肺病及肠”的物质基础。5.初步发现VIP、SP、CGRP、iNOS等神经肽物质可能是“肺病及肠”的物质基础。6.模型大鼠肺病传变到“肠”的时间节点在造模50天左右,肺病是否能传变到“肠”,主要取决于肺脏病变的病理损伤程度,而不单纯取决于造模时间的长短。

莫镜^[4]（2011）在《Rho-ROCK信号通路介导缺氧所致人肺微血管内皮细胞肌动蛋白细胞骨架重构和重组人白介素10对缺氧条件下人肺微血管内皮细胞凋亡变化规律的影响》文中研究指明1目的1.1探讨缺氧（hypoxia）对人肺微血管内皮细胞（HPMVECs）肌动蛋白细胞骨架（F-actin）重构的影响,以及Rho-ROCK信号通路在缺氧引起肌动蛋白细胞骨架重构过程中的作用。1.2研究缺氧条件下,HPMVECs内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）活性的变化规律和重组人白介素10（rhIL-10）对缺氧HPMVECs凋亡的影响。2方法2.1在缺氧前用ROCK的特异性抑制剂H-1152,最佳浓度（10 nmol/L）对体外培养的HPMVECs进行预处理0.5h,再分为不同缺氧时间组进行缺氧6h、12h及24h处理,并设常规培养正常对照组,每组设8个复孔。用激光共聚焦显微镜（LSCM）观察缺氧或使用H-1152对HPMVECs细胞肌动蛋白细胞骨架重构的影响。流式细胞技术检测各组HPMVECs F-actin的平均荧光强度的变化,行统计学分析。2.2常规培养HPMVECs细胞株,分为5组:正常对照组（常规培养）;缺氧（5% CO2,95% N2）对照组;缺氧培养并加入rhIL-10以（10ng/mL,50ng/mL,100ng/mL）的浓度分别干预的rhIL-10低剂量干预组、rhIL-10中剂量干预组、rhIL-10高剂量干预组。培养4h、12h、24h、48h离心收集细胞,荧光显微镜观察HPMVECs 24h核荧光染色,分析荧光强度,化学比色法检测细胞核内Caspase-3活性检测,行统计学分析。3结果3.1 HPMVECs 6h各组, LSCM观察显示F-actin细胞骨架未发生明显改变,流式细胞术行F-actin荧光强度分析与正常对照组比较差别无统计学意义（P>0.05）。缺氧12h组,用LSCM观察到F-actin细胞骨架已发生少量解聚,运用流式细胞术行F-actin荧光强度分析,提示F-actin含量增加与正常对照组比较差别有统计学意义（P<0.05）;而H-1152+缺氧12h组,细胞骨架及细胞周边的肌动蛋白丝带无明显变化,胞浆中仅有极少量模糊的肌动蛋白,流式细胞术行F-actin荧光强度分析提示F-actin含量与缺氧组比较差别有统计学意义（P<0.05）。缺氧24h组,用LSCM观察到F-actin细胞骨架已发生大量解聚,细胞骨架明显改变,流式细胞术行F-actin荧光强度分析提示F-actin含量与正常对照组比较差别有统计学意义（P<0.05）; H-1152+缺氧24h,细胞骨架及细胞周边的肌动蛋白丝带有少量变化,胞浆中有模糊的肌动蛋白出现,流式细胞术行F-actin荧光强度分析提示F-actin含量与正常对照组比较及缺氧组比较差别均存在统计学意义（P<0.05）。H-1152各时间组在用LSCM观察F-actin细胞骨架与正常对照组比较无明显差异,流式细胞术行F-actin荧光强度分析提示F-actin含量与正常对照组比较差别无统计学意义（P>0.05）。HPMVECs经缺氧处理,肌动蛋白细胞骨架发生解聚,应力纤维的排列和分布改变;事先使用H-1152再进行缺氧处理,可防止缺氧所致HPMVECs内F-actin解聚及其含量增加,同时应力纤维在细胞内排列和分布趋向正常。3.2取24h各组行凋亡细胞核Hoechst荧光染色,灰度值分析低氧对照组和低、中、高rhIL-10干预组与正常对照组比较升高（P<0.05）;低、中、高rhIL-10干预组与缺氧对照组比较降低（P<0.05）。凋亡蛋白Caspase-3相对活性,4h各组别无明显差异（P>0.05）;12h缺氧对照组、低、中rhIL-10干预组与正常组比较升高（P<0.05）,高剂量rhIL-10干预组与正常对照组无明显差异（P>0.05）,rhIL-10干预各组与缺氧对照组比较降低（P<0.05）;24h缺氧对照组、rhIL-10干预低、中、高剂量组与正常对照组比较升高（P<0.05）,低、中、高剂量rhIL-10干预组与缺氧对照组比较明显降低（P<0.05）;48h缺氧对照组与低剂量rhIL-10干预组与正常对照组比较升高（P<0.05）,其余各组别无明显差异（P>0.05）;缺氧凋亡峰值见于24h。4结论4.1缺氧所致HPMVECs内的F-actin重构改变。4.2 Rho-ROCK信号通路参与缺氧所致HPMVECs内F-actin细胞骨架的重构改变。4.3缺氧可促进HPMVECs凋亡,缺氧条件下,Caspase-3在HPMVECs的表达明显升高。4.4 rhIL-10可一定程度地抑制缺氧HPMVECs的凋亡。

陈玉君,刘唐威,陈克正,庞玉生^[5]（2010）在《内皮素-1受体拮抗剂在预防新生鼠肺出血中的作用》文中研究说明目的探讨内皮素-1（endothelin-1,ET-1）受体拮抗剂——波生坦能否阻断肺出血的形成。方法生后7～8 d的Wister新生鼠106只,随机分为空气组（C）10只、实验组和波生坦组各48只,实验组和波生坦组再分别分为4个亚组:缺氧组（H）、低温缺氧组（HH）、低温缺氧后常氧复温组（HHR）和低温缺氧后高氧复温组（HHRO2）各12只,波生坦组预防性给予波生坦。C组置常温室内,H组缺氧6 h（FiO2 5%～6%）,HH组低温缺氧（FiO2 5%～6%,10℃±1℃）6 h,HHR组同上低温缺氧,随后常氧下复温2 h,吸入空气,HHRO2组同HHR组但复温时吸入高浓度氧（FiO2>95%）。各组取肺组织,观察肺大体改变,放射免疫法检测实验组肺组织中ET-1含量。结果实验组死亡13例,波生坦组死亡5例,两组死亡率差异有统计学意义（χ2=4.376,P<0.05）;实验组中各亚组ET-1含量均显着增高,与正常组比较,P均<0.01;实验组肺大体改变包括肺水肿、肺出血,波生坦组肺大体病理改变减轻,肺出血程度减弱,其中HHR和HHRO2亚组的病理分级与实验组中的HHR和HHRO2亚组相比,差异有统计学意义（Z=2.614、2.940,P均<0.05）。结论 ET-1受体拮抗剂——波生坦能减轻肺出血程度。

徐桂霞^[6]（2010）在《60例新生儿肺出血的临床资料分析及干预策略的研究》文中指出目的通过研究60例肺出血新生儿的相关发病因素、临床表现及诊治过程,以探讨与新生几肺出血密切相关的危险因素,并分析其不同的临床表现特点,及研究根据不同临床分期采取不同诊治措施所取得的临床疗效。以制定符合本地区新生儿肺出血特点的防范措施,降低新生儿肺出血的发生率,提高肺出血的治愈率,改善新生儿肺出血患儿的预后。方法选取了2006年1月～2008年12月于聊城市第二人民医院新生儿重症监护室诊治病房（NICU）住院的60例确诊为新生儿肺出血患儿作为观察组,均符合中华医学会儿科学分会新生儿学组2001年制定的新生儿肺出血的诊断标准。对其临床资料进行回顾性分析,总结其临床特点,以探讨影响新生儿肺出血的相关因素,及给予各种干预措施后的效果。为了探讨新生儿肺出血的相关因素,本文选择了2006年1月～2008年12月于我院新生儿重症监护室诊治的60例确诊为新生儿肺出血患儿作为观察组,同时从同期住院患儿中选取120例非新生儿肺出血组患儿作为对照组,对两组患儿生理性因素（胎龄、体重、性别、分娩方式）、病理性因素（母患妊娠期高血压、妊娠期糖尿病、胎膜早破史、新生儿窒息或新生儿缺氧缺血性脑病、新生儿颅内出血、感染性肺炎、胎粪吸入史、新生儿湿肺、低体温或寒冷损伤、先天性心脏病、高胆红素血症、新生儿肺透明膜病、弥漫性血管内凝血）及医源性因素（外源性表面活性物质的应用、氧中毒、机械通气的应用）等20个可能相关因素进行单因素分析及多因素分析。统计方法采用SPSS13.0统计软件。单因素分析应用x2检验,P<0.05有统计学意义。多因素应用Logistic回归分析,计算OR值及OR的95%可信区间,从而得到各相关因素在致病危险性上的大小关系。同时,对新生儿肺出血患儿的早期临床表现进行总结,以期能早期发现新生儿肺出血的发生。并对新生儿肺出血患儿采用不同治疗方法取得的效果进行比较。治疗方法包括：对照组：采用吸氧、抗感染、改善呼吸、循环等综合措施,治疗组在上述综合治疗基础上采用机械通气治疗。机械通气治疗组又分为气管插管时间的早晚,及是否气管内应用止血药物等。率的比较采用x2检验。结果本院近两年来,新生儿肺出血发病率高。单因素分析显示母孕期患妊高症、早产儿、低体重、新生儿窒息或新生儿缺氧缺血性脑病、新生儿颅内出血、感染性肺炎、低体温或寒冷损伤、不合理应用机械通气有显着性差异（P<0.05）,妊娠期糖尿病、胎膜早破史、性别、分娩方式、胎粪吸入史、新生儿湿肺、先天性心脏病、高胆红素血症、新生儿肺透明膜病、弥漫性血管内凝血、外源性表面活性物质的应用及氧中毒无显着性差异（P>0.05）。多因素Logistic回归分析显示母孕期患妊高症、早产儿、低体重、新生儿窒息或新生儿缺氧缺血性脑病、感染性肺炎、低体温或寒冷损伤、不合理应用机械通气为新生儿肺出血主要的危险因素。机械通气治疗新生儿肺出血的存活率明显提高,且早期给予气管插管及积极应用气管内止血药物均能降低新生儿肺出血患儿的死亡率。结论母孕期患妊高症、早产儿、低体重、新生儿窒息或新生儿缺氧缺血性脑病、新生儿颅内出血、感染性肺炎、低体温或寒冷损伤、不合理应用机械通气是新生儿肺出血的独立危险因素。多因素Logistic回归分析显示母孕期患妊高症、早产儿、低体重儿、新生儿窒息或新生儿缺氧缺血性脑病、感染性肺炎、低体温或寒冷损伤、不合理应用机械通气为主要的危险因素。早期发现、早期治疗新生儿肺出血的相关危险因素,对于预防新生儿肺出血的发生有重要意义。新生儿肺出血的早期临床表现无特异性,机械通气治疗新生儿肺出血可取得良好疗效,但应当合理应用,且应根据患儿病情早期给予气管插管,并积极应用气管内止血药物。给予有效的防范、治疗措施,能够提高新生儿肺出血的存活率。

李小乐^[7]（2009）在《内皮素受体、内皮素转换酶-1在新生鼠肺出血发生过程中肺内的表达》文中提出目的:分段建立低温缺氧/复温供氧新生鼠肺出血模型,探讨新生鼠肺出血发生过程中内皮素受体A、内皮素受体B及内皮素转换酶-1在肺组织内的表达。方法:选用出生后57天的Wistar新生鼠75只,SPF级,随机分为正常组（C组）、缺氧组（H1组）、低温组（H2组）、低温缺氧组（H3组）和低温缺氧后复温供氧组（H4组）各15只。C组置室温空气（常温常氧）中,H1组给予缺氧干预（FiO256%）6h,H2组置低温环境中（温度10±1℃）6h,H3组置低温缺氧环境中6h（干预条件同上）,H4组置低温缺氧环境中6h后,置37℃环境中复温2h并通入高浓度氧（FiO2>95%）。各组新生鼠处死后取肺组织,观察肺大体情况和肺组织病理学改变（HE染色）,采用荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ-RT-PCR）方法检测肺组织中内皮素受体AmRNA（ETAmRNA）、内皮素受体BmRNA（ETBmRNA）,内皮素转换酶-1mRNA（ECE-1mRNA）在肺组织内的表达情况。结果:1.实验组新生鼠共死亡11只,死亡率18.33%,C组无死亡;H1组、H2组、H3组、H4组肺大体均有改变,包括肺水肿、点状肺出血、局灶性肺出血和弥漫性肺出血。2. ETAmRNA在H1组、H2组、H3组表达增强（与C组比较,P<0.01）;经复温供氧后,ETAmRNA表达明显下降,降至C组以下（与其余四组比较, P<0.01）。3. ETBmRNA在H1组、H2组、H3组表达增强,经复温供氧后仍处于较高水平（H1组、H2组、H3组与C组比较P<0.01, H4组与C组比较P<0.05）。4. ECE-1mRNA在H1组、H2组、H3组表达增强（与C组比较, P<0.01）,经复温供氧后有所下降,降至C组以下（与C组比较P<0.05,与H1组、H2组、H3组比较P<0.01）。结论:1.低温缺氧/复温供氧能成功诱发新生鼠肺出血,缺氧、低温、及复温供氧等不同干预因素均对新生鼠肺组织造成损伤;2.缺氧、低温均可促进ETAmRNA、ETBmRNA、ECE-1mRNA的表达增强;复温供氧可使ETAmRNA、ECE-1mRNA表达明显下降;3. ETA、ETB、ECE-1在肺出血形成过程中可能通过影响ET-1表达及其生物学作用而参与了肺出血的形成。

孙海华^[8]（2008）在《实验性胸腹撞击伤后外源性CGRP对心肌细胞保护的研究》文中认为胸腹撞击伤是平时意外事故,特别是交通事故中的常见伤类,患者大多有合并伤和或严重并发症,病情凶险。胸腹撞击所致的钝性心脏损伤以心肌挫伤（myocardial contusion, MC）最为常见,发生率为9%76%不等[1]。胸腹撞击伤后可引起机体血流动力学不稳定和多种细胞因子的释放,从而造成继发性器官损害。这种状态若得不到及时纠正,是胸腹撞击伤后重要的死亡原因之一,也是临床救治工作中的重点与难点。因此,早期预防与治疗胸腹撞击伤后因心脏功能障碍造成的血液循环紊乱和炎性因子失衡带来的继发性损害是临床救治的关键所在。近年来研究发现降钙素基因相关肽（Calcitonin-gene-related Peptide,CGRP）具有强烈的扩血管作用,且可抑制创伤后血管收缩因子的释放,阻断体内过氧化反应,同时对损伤后的心肌具有一定的保护作用。本研究通过建立胸腹撞击伤动物模型的基础上,采用不同剂量的外源性降钙素基因相关肽预处理、检测胸腹撞击伤伤前与伤后血管内皮素的水平,同时测定典型心脏损伤因子,观察外源性降钙素基因相关肽对创伤后兔心功能的影响及其可能的作用机制,以期能为临床救治提供较可靠的理论依据。方法:实验动物选择成年新西兰兔,雌雄不限,将其随机分为A、B、C三组。A组:对照组;B组:常规剂量降钙素基因相关肽处理组（0.012μg /kg）;C组:大剂量降钙素基因相关肽处理组（0.024μg /kg）。BIM-Ⅳ型生物撞击机撞击动物剑突致伤。测定不同时相点外周血LDH、CK、ET、cTnT及处死动物后心脏组织内MDA、SOD及游离细胞钙离子的平均荧光强度。同时对心、肺、肝损伤的严重程度进行AIS评分和AAST分级、光镜下观察心脏损伤及合并肝、肺损伤的组织病理学特点。本研究的主要结果与结论如下:1.本研究建立的肝脏撞击伤模型具有如下特点:①撞击设备操作简便、物理参数容易控制、撞击部位准确及可重复性好等优点;②实验动物心脏损伤的临床病理、类型、伤情与临床较为接近;③撞击伤的同时合并有肋骨骨折、心、肝、肺的损伤,AIS评分1～5分;④可利用致伤模型进行力学因素分析及多项实验指标的检测;⑤为临床研究胸腹撞击伤后各种病理生理变化提供了理想的模型基础。2.本研究发现,伤前各组间血清ET、LDH、CK水平比较无明显差异（P<0.05）,胸腹撞击伤后（伤后1、3、7h）,LDH、CK、ET值均显着高于伤前（P>0.01）,B组、C组非常显着低于A组（P<0.01）,C组非常显着低于B组（P<0.01）。试验结果表明外源性CGRP能够显着减低外周血ET的水平且呈剂量依赖性,在液体复苏的同时,静脉应用CGRP后,血清cTnT、LDH、CK变化明显小于单纯液体复苏组,且呈剂量依赖性,说明CGRP对严重创伤后心肌损伤有保护作用。其作用机制是CGRP阻断了因创伤后血液内ET含量的升高而引发的血管的强烈收缩及加重心肌损伤的酶的活性增强,而导致的恶性循环这两个主要环节的发生。目前国内外对于CGRP和ET相互作用的研究,主要集中于肝脏慢性疾病和神经系统类病变,而在胸腹撞击伤中直接利用外源性CGRP保护心肌功能尚未见报道。本研究发现,伤前三组心肌组织内MDA、SOD、cT-nT含量无明显差异（P<0.05）,伤后B组、C组非常显着低于A组（P<0.01）,且C组明显低于B组（P<0.05）;SOD活性B组、C组非常显着高于A组（P<0.01）,且C组明显高于B组（P<0.05）;同时心肌细胞内[Ca2+]平均荧光强度B组、C组非常显着低于A组（P<0.01）,且C组明显低于B组（P<0.05）。试验结果表明外源性补充CGRP能剂量依赖性地下调MDA。并使SOD活性升高,同时其对脂质过氧化的影响作用与心肌细胞的损伤程度呈高度相关性,说明CGRP抗脂质过氧化作用参与了保护心肌细胞。CGRP与受体结合后,激活腺苷酸环化酶,防止细胞内钙超载、防止创伤后心肌酶漏出和维持心肌细胞膜稳定性是其心肌细胞保护作用的三个主要机制。4.本研究进一步证实,创伤后外源性补充CGRP可有效解决因血管收缩因子增高而引发的血管持续收缩和心肌细胞持续缺血、缺氧情况。同时,其抗脂质过氧化作用也可防止伤后体内过氧化物的蓄积和心肌细胞内的钙离子超载而造成心肌的损伤,从而对心肌细胞具有肯定的保护作用。因此,胸腹撞击伤后外源性补充CGRP对心肌继发性损害的防治具有重要的临床意义。

陈玉君^[9]（2007）在《内皮素-1、血管内皮生长因子、缺氧诱导因子-1在新生鼠肺出血发生中的作用》文中认为第一部分低温缺氧/复温供氧新生鼠肺出血模型的分段建立目的分段建立低温缺氧/复温供氧新生鼠肺出血模型,探讨新生鼠在缺氧、低温缺氧、低温缺氧后常氧复温、低温缺氧后高氧复温等不同影响因素作用下肺大体和组织学的改变;方法选用出生后7～8天的Wister新生鼠58只,随机分为正常组（C组）10只,缺氧组（H组）,低温缺氧组（HH组）,低温缺氧后常氧复温组（HHR）和低温缺氧后高氧复温组（HHRO2组）各12只。C组置常温室内,H组予缺氧（FiO25～6%）6h,HH组缺氧同时置10±1℃冷室内,予低温缺氧6h,HHR组同HH组进行低温缺氧6h,然后置37℃环境复温并吸入空气（常氧）2h,HHRO2组同HHR组,但复温时供高浓度氧（FiO2＞95%）。各组新生鼠处死后取肺组织,观察肺大体情况,切片HE染色观察肺组织病理学改变。肺大体改变按等级不同分为5级。结果1.实验组新生鼠共死亡13只,死亡率27.08%（13/48）,C组无死亡;2.H组、HH组、HHR组和HHRO2组肺大体均有改变,H组呈现水肿,HH瘀血明显,可见点状和局灶性出血,HHR组和HHRO2组见局灶出血增多,HHR组有2例弥漫性出血,HHRO2组有4例呈弥漫性出血,弥漫性肺出血主要发生在复温复氧阶段;各实验组肺大体改变与C组比较均有显着性差异;组间比较除HHR组与HHRO2组外,其余各组间比较均有显着性差异。3.各实验组组织学改变包括肺泡及间质水肿、肺间隔断裂、肺泡扩张及融合和肺泡出血。结论低温缺氧/复温供氧能成功诱发新生鼠肺出血,肺出血发生由肺水肿向点状肺出血、局灶肺出血、弥漫性肺出血发展,弥漫性肺出血主要发生在复温供氧后;缺氧、低温缺氧及复温供氧各阶段均对肺组织造成损伤;高浓度氧可能造成更严重损伤。第二部分内皮素-1、血管内皮生长因子、缺氧诱导因子-1在新生鼠肺出血发生过程中肺内的表达目的探讨在低温缺氧/复温供氧新生鼠肺出血过程中内皮素-1（ET-1）、血管内皮生长因子（VEGF）、缺氧诱导因子-1（HIF-1）在肺组织中的表达与作用。方法选用出生后7～8天的Wister新生鼠58只,随机分为正常组（C组）10只,缺氧组（H组）,低温缺氧组（HH组）,低温缺氧后常氧复温组（HHR）和低温缺氧后高氧复温组（HHRO2组）各12只,模型分段复制过程同第一部分。分别采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测肺组织中前内皮素原mRNA（ppET-1mRNA）、VEGFmRNA、缺氧诱导因子-1αmRNA（HIF-1αmRNA）的表达;放射免疫方法检测肺组织中ET-1含量;WesternBlot方法和免疫组化方法检测VEGF在肺组织中的表达。结果1.ppET-1mRNA在H组、HH组、HHRO2组表达增强,与C组比较,P均<0.01;ET-1含量在各实验组均增高,进入复温供氧期后有所下降,各组与C组比较P均<0.01;在H组、HH组,ppET-1mRNA表达与肺组织中ET-1含量呈正相关,分别r=0.72和r=0.67,P均<0.05。2.VEGF188mRNA在H组、HH组表达增强,与C组比较,P均<0.01;VEGF蛋白在各实验组表达增强,与C组比较,H组、HH组P均<0.05,HHR组和HHRO2组P均<0.01。3.在H、HH组,ET-1与VEGF表达成正相关,分别r=0.72和r=0.66,P均<0.05;4.HIF-1αmRNA表达在各组中无显着性差异,P>0.05。结论1.ET-1和VEGF在各个阶段都参与肺出血的形成;2.ET-1可能促进了VEGF的表达;3.HIF-1α在肺出血中作为核转录因子参与调控ET-1和VEGF的表达,但低氧对其调控主要在转录后水平。第三部分内皮素-1双重受体阻断剂对新生鼠肺出血的预防作用目的观察ET-1双重受体阻断剂（波生坦）能否降低低温缺氧/复温供氧新生鼠肺出血发生率以及肺组织中VEGF的表达,评价波生坦在预防肺出血发生中的作用。方法选用出生后7～8天的Wister新生鼠106只,随机分为正常组（C组）10只,实验组和波生坦组各48只;实验组和波生坦组再分为H、HH、HHR、HHRO24个亚组各12只,波生坦组实验前2h经胃管灌注波生坦,模型分步复制过程同第一部分。观察各组肺大体改变,采用Western Blot方法检测VEGF在肺组织中的表达。结果1.波生坦组新生鼠死亡5只,实验组死亡13只,两组死亡率比较有显着性差异,X2=3.35,P＜0.05;2.实验组肺大体改变同第一部分,包括水肿、点状出血、局灶性出血甚至弥漫性出血,波生坦组中各亚组肺大体改变均较实验组有所减轻,从HH亚组开始仍见点状肺出血发生,HHR和HHRO2亚组可见局灶性出血,但未出现弥漫性出血,HHR和HHRO2亚组肺大体改变与实验组相应亚组比较有显着性差异,分别T=193.5,P＜0.05和T=199.0,P＜0.01;3.与正常组比较,波生坦组中各亚组VEGF表达无显着性差异,H=3.43,P＞0.05。结论ET-1受体阻断剂能减轻新生鼠低温缺氧/复温供氧肺出血的发生,其机制与阻断ET-1的作用及下调VEGF表达有关。

陈克正^[10]（2007）在《新生儿肺出血病因探讨》文中提出

二、外源性降钙素基因相关肽预防内皮素-1致新生鼠肺出血的实验研究（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、外源性降钙素基因相关肽预防内皮素-1致新生鼠肺出血的实验研究（论文提纲范文）

（1）低温低氧对新生鼠肺组织内皮素受体表达的影响（论文提纲范文）

（2）降钙素基因相关肽基因导入对脑死亡大鼠的肺保护作用（论文提纲范文）

（3）基于肺病模型大鼠病理形态学及相关调控物质变化探讨“肺病及肠”病理传变规律及其机制（论文提纲范文）

（4）Rho-ROCK信号通路介导缺氧所致人肺微血管内皮细胞肌动蛋白细胞骨架重构和重组人白介素10对缺氧条件下人肺微血管内皮细胞凋亡变化规律的影响（论文提纲范文）

（5）内皮素-1受体拮抗剂在预防新生鼠肺出血中的作用（论文提纲范文）

（6）60例新生儿肺出血的临床资料分析及干预策略的研究（论文提纲范文）

（7）内皮素受体、内皮素转换酶-1在新生鼠肺出血发生过程中肺内的表达（论文提纲范文）

（8）实验性胸腹撞击伤后外源性CGRP对心肌细胞保护的研究（论文提纲范文）

（9）内皮素-1、血管内皮生长因子、缺氧诱导因子-1在新生鼠肺出血发生中的作用（论文提纲范文）

四、外源性降钙素基因相关肽预防内皮素-1致新生鼠肺出血的实验研究（论文参考文献）

• [1]低温低氧对新生鼠肺组织内皮素受体表达的影响[J]. 李小乐,黄萍,陈玉君. 广西医科大学学报, 2012(06)
• [2]降钙素基因相关肽基因导入对脑死亡大鼠的肺保护作用[D]. 孙振涛. 郑州大学, 2012(09)
• [3]基于肺病模型大鼠病理形态学及相关调控物质变化探讨“肺病及肠”病理传变规律及其机制[D]. 惠毅. 成都中医药大学, 2012(04)
• [4]Rho-ROCK信号通路介导缺氧所致人肺微血管内皮细胞肌动蛋白细胞骨架重构和重组人白介素10对缺氧条件下人肺微血管内皮细胞凋亡变化规律的影响[D]. 莫镜. 广州医学院, 2011(05)
• [5]内皮素-1受体拮抗剂在预防新生鼠肺出血中的作用[J]. 陈玉君,刘唐威,陈克正,庞玉生. 临床儿科杂志, 2010(11)
• [6]60例新生儿肺出血的临床资料分析及干预策略的研究[D]. 徐桂霞. 泰山医学院, 2010(05)
• [7]内皮素受体、内皮素转换酶-1在新生鼠肺出血发生过程中肺内的表达[D]. 李小乐. 广西医科大学, 2009(10)
• [8]实验性胸腹撞击伤后外源性CGRP对心肌细胞保护的研究[D]. 孙海华. 第三军医大学, 2008(03)
• [9]内皮素-1、血管内皮生长因子、缺氧诱导因子-1在新生鼠肺出血发生中的作用[D]. 陈玉君. 广西医科大学, 2007(09)
• [10]新生儿肺出血病因探讨[J]. 陈克正. 中国小儿急救医学, 2007(02)

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